CHGF-003 是從大鼠乳腺癌組織中分離建立的永生化細胞系，屬于上皮樣細胞形態(tài)，貼壁生長。該細胞系具有典型的乳腺癌細胞生物學特征，如增殖能力強、可形成克隆集落，且保留了部分原發(fā)腫瘤的分子標志物（如雌激素受體 ER、孕激素受體 PR 等），但具體表達水平需通過實驗驗證。其染色體核型分析顯示為異倍體，說明基因組穩(wěn)定性較差，這與乳腺癌細胞的遺傳多樣性和惡性特征一致。作為大鼠來源的細胞模型，CHGF-003 在種屬特異性研究中具有獨特優(yōu)勢，可避免人源細胞與大鼠實驗動物模型之間的種屬差異問題，尤其適用于乳腺癌基礎研究和藥物篩選的臨床前實驗。
-
培養(yǎng)基與環(huán)境
CHGF-003 通常使用含 10% 胎牛血清（FBS）的 DMEM 或 RPMI 1640 培養(yǎng)基，添加 1% 雙抗（青霉素 + 鏈霉素），置于 37℃、5% CO?培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。需注意不同實驗室可能優(yōu)化過培養(yǎng)條件，建議**培養(yǎng)時參照細胞來源方提供的說明書。
-
傳代與凍存
當細胞融合度達 80%~90% 時需傳代，采用胰酶 - EDTA 消化法（0.25% 胰酶消化 1~2 分鐘），傳代比例建議 1:2~1:3，避免密度過低影響細胞狀態(tài)。凍存時使用含 10% DMSO、20% FBS 的培養(yǎng)基，按每管 1×10?~5×10?細胞密度分裝，程序降溫后轉入液氮保存。
-
質量控制
-
污染檢測：定期通過鏡檢觀察培養(yǎng)基是否渾濁、細胞形態(tài)是否異常，結合支原體檢測試劑盒確保無微生物污染。
-
活力評估：臺盼藍染色法檢測細胞存活率，正常傳代細胞活力應＞90%，復蘇后活力需＞85%。
-
特性驗證：通過 Western blot 或免疫熒光檢測乳腺癌相關標志物（如 HER2、Ki-67），確認細胞屬性。
-
乳腺癌發(fā)生機制研究
CHGF-003 可用于探究激素調控、基因突變（如 BRCA1/2）或表觀遺傳改變在乳腺癌啟動與進展中的作用。例如，通過敲除 ER 基因觀察細胞增殖能力變化，或使用 DNA 甲基化抑制劑分析基因表達譜差異，揭示表觀調控網(wǎng)絡。
-
藥物篩選與藥效評價
該細胞系對化療藥物（如紫杉醇、阿霉素）和靶向藥物（如 HER2 抑制劑）敏感，可用于體外藥物毒性測試和療效篩選。結合大鼠原位移植模型，還可進一步驗證藥物在體內(nèi)的抗腫瘤效果及轉移抑制能力，為臨床前研究提供轉化數(shù)據(jù)。
-
腫瘤微環(huán)境研究
CHGF-003 與成纖維細胞、免疫細胞共培養(yǎng)時，可模擬腫瘤微環(huán)境中的細胞間相互作用，分析基質細胞對乳腺癌細胞侵襲、遷移的影響，或探討免疫逃逸機制。
-
基因編輯與靶向治療
利用 CRISPR-Cas9 等工具對 CHGF-003 進行基因編輯，可構建攜帶特定突變的細胞株（如 P53 缺失），用于研究靶向治療的敏感性或耐藥機制。
CHGF-003 作為永生化細胞系，與原發(fā)腫瘤的異質性可能存在差異，實驗結果需結合臨床樣本驗證。此外，大鼠與人類乳腺癌的分子特征不完全一致，在轉化醫(yī)學研究中需謹慎外推結論。培養(yǎng)過程中應避免過度傳代（通常建議傳代≤20 代），以防細胞特性發(fā)生漂移。
總之，CHGF-003 為乳腺癌研究提供了便捷的大鼠模型工具，其應用需結合實驗設計合理選擇，并通過多維度驗證確保數(shù)據(jù)可靠性。